Revisaõ 15/01/2025
Betaglicanos, um grupo diverso de polissacarídeos, são encontrados nas paredes celulares de vários organismos, incluindo bactérias, leveduras, fungos, algas, cogumelos e plantas, e exibem uma ampla gama de estruturas químicas. Embora os betaglicanos possam não ser tão potentes quanto as endotoxinas bacterianas na estimulação do sistema imunológico, eles têm a capacidade de modular respostas imunológicas.
Os betaglicanos podem contaminar produtos farmacêuticos durante a fabricação, possivelmente originados de fontes como trajes de proteção individual (EPI), materiais à base de celulose, como filtros de acetato de celulose e tampões de algodão, ou contaminação fúngica de materiais de partida (incluindo sacarose e tampões contendo sacarose), ferramentas e equipamentos, apresentando um desafio para a qualidade e segurança dos produtos farmacêuticos.[1]
Regulamentações para Detecção de Betaglicano
Embora as endotoxinas bacterianas tenham regulamentações estabelecidas, atualmente não há regulamentações em vigor para os níveis de contaminantes de Betaglicano encontrados em produtos farmacêuticos. Não há um método abrangente e padronizado para detectar essas substâncias, nem há uma abordagem unificada para estabelecer níveis aceitáveis. Apesar disso, há um movimento global na indústria e entre os órgãos reguladores para identificar e medir Betaglicanos e estabelecer limites seguros para essas substâncias.[2]
Efeito do Betaglicano no Teste de Endotoxina
Assim como a endotoxina, os betaglicanos desencadeiam uma reação em cadeia envolvendo proteínas encontradas no lisado extraído dos amebócitos do caranguejo-ferradura, Limulus polyphemus, que é amplamente usado no ensaio de lisado de amebócito Limulus (LAL). O lisado de amebócitos, em seu estado bruto, contém duas proteínas específicas que iniciam a cascata proteolítica quando expostos à endotoxina e aos betaglicanos. Durante a detecção de endotoxina, se o ensaio LAL for realizado com lisado não processado, a presença do fator G pode levar a um resultado falso-positivo para os betaglicanos.[3]
Para contornar a interferência causada pelos glicanos, o ensaio é ajustado para incorporar reagentes bloqueadores de glicanos ou conduzido com fator C recombinante. Da mesma forma, quando o fator C é eliminado do lisado, o fator G residual desencadeia uma cascata proteolítica em resposta à detecção de betaglicanos.[4]
Além disso, um valor de pH que se desvia da faixa ideal de 6 a 8 pode levar à desnaturação e inativação da proteína, aumentando assim a probabilidade de obter resultados falso-negativos. A PYROSTAR™ criou uma nova linha de reagentes ES-F, visando especificamente endotoxinas, com o benefício adicional do tampão ES-F já incorporado à formulação. Os reagentes ES-F da PYROSTAR™ são projetados especificamente para evitar reações com (1→3)-β-D-glicano, minimizando a possibilidade de resultados falso-positivos. Além disso, esses kits incorporam um tampão ES-F, que utiliza Tris para neutralizar ácidos e bases, mantendo efetivamente o pH da mistura de reação dentro da faixa ideal de 6–8. Esse controle de pH minimiza a probabilidade de resultados falso-negativos.
Bibliografia
1.Neun, B.W., et al., Detection of Beta-Glucan Contamination in Nanotechnology-Based Formulations. Molecules, 2020. 25(15).
2.Barton, C., et al., Beta-glucan contamination of pharmaceutical products: How much should we accept? Cancer Immunol Immunother, 2016. 65(11): p. 1289-1301.
3.Roslansky, P.F. and T.J. Novitsky, Sensitivity of Limulus amebocyte lysate (LAL) to LAL-reactive glucans. J Clin Microbiol, 1991. 29(11): p. 2477-83.
4.Tran, T. and S.G. Beal, Application of the 1,3-β-D-Glucan (Fungitell) Assay in the Diagnosis of Invasive Fungal Infections. Arch Pathol Lab Med, 2016. 140(2): p. 181-5.
Lisa Komski é Gerente Geral de Vendas da Divisão LAL da FUJIFILM Wako Chemicals USA Corporation. Com quase 30 anos de carreira nas indústrias química e de ciências da vida, ela se estabeleceu como uma forte profissional de desenvolvimento de negócios, com grande foco no atendimento ao cliente. Quando criança, Lisa sonhava em se tornar médica. Portanto, ter a oportunidade de gerenciar a linha PYROSTAR(TM) nos últimos 6 anos permitiu que ela se envolvesse em um negócio dinâmico que apóia sua paixão ao longo da vida para ajudar a proteger a saúde e a segurança de outros. Lisa é formada em Biologia e Tecnologia Médica e também é fluente nos idiomas inglês e espanhol. Ao ter a oportunidade de passar um tempo pessoal, Lisa curte a família, amigos, viaja para o exterior e mima o seu adorável neto. Entre em contato comigo - Perfil do LinkedIn