Juego de Reactivos Único SLP-HS II
Determinación cuantitativa de peptidoglicano (PG) y (1->3)-β-D-glucano en soluciones parentales y fármacos activos
El juego de reactivo único SLP-HS II es capaz de detectar tanto el peptidoglicano (PG) como el (1->3)-β-D-glucano (BDG). El producto utiliza un mecanismo de autodefensa del gusano de seda Bombyxmori que conduce a un cambio de color al generar un pigmento de melanina negro en presencia de contaminación microbiana. Dado que el PG se encuentra en todas las paredes celulares bacterianas y el BDG se encuentra en la mayoría de los hongos, el reactivo SLP (plasma de larvas de gusanos de seda) constituye un método de banda ancha y muy sensible para la detección de contaminación microbiana.
CARACTERÍSTICAS CLAVE
- Principio de prueba basado en el reactivo SLP (Silkworm Larvae Plasma)
- Ensayo cinético colorimétrico
- PG aislado de S. aureus utilizado como estándar
- Límite de detección de BDG: 1pg/ mL
- Límite de detección de PG: 10pg/ mL
- Análisis automatizado mediante el software Toximaster®
- Tiempo de medición: 120 minutos a 30 °C
- Pruebas para la contaminación microbiana en el dializado y sus materias primas
- Detección de compuestos fúngicos en productos farmacéuticos, dispositivos médicos, productos biológicos y productos de ingeniería genética
- Investigación de contaminantes bacterianos en agua comercial
| Número de catálogo | Nombre del Producto | Cantidad |
| 296-81001 | Juego de Reactivos Único SLP-HS II |
20 ensayos |
CONTENIDO DEL KIT
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1 |
SLP-HS Reagent II (Lyophilized reagent containing silkworm Larvae Plasma and DOPA) |
0.1 mL x 20 vials |
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2 |
SLP diluent
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5.0 mL x 2 vials
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3 |
Standard (digested peptidoglycan from Staphylococcus aureus)
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0.5 mL x 1 vial
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INTRODUCCIÓN
La hemolinfa del gusano de seda Bombyx mori contiene un mecanismo de autodefensa denominado “sistema de cascada de profenoloxidasa (Pro-PO)”, que es activado por el peptidoglicano (PG) y el (1->3)-β-D-glucano (BDG ), lo que resulta en la activación de la profenoloxidasa (PO) y la producción de intermediarios tóxicos contra los patógenos invasores.
Aunque el mecanismo exacto aún no está del todo aclarado, se ha postulado que diferentes serina proteasas están involucradas en este proceso, lo que finalmente conduce a la escisión de la Pro-PO inactiva en la PO activa y a la formación de melanina.
El reactivo SLP es un producto liofilizado preparado en condiciones estériles a partir de la hemolinfa del gusano de seda, que contiene todos los factores que intervienen en el sistema de cascada Pro-PO. Tras la activación por el PG de bacterias y el BDG de hongos y levaduras, la melanización se produce en dos pasos, o sea, a través de la oxidación de L-DOPA (L-3,4-dihidroxifenilalanina) en dopacromo y la posterior conversión de este último en pigmento de melanina negra, lo que da como resultado el cambio de color de la solución.
Dado que el PG se encuentra en todas las paredes celulares bacterianas y el BDG se encuentra en la mayoría de los hongos, el reactivo SLP constituye un método de banda ancha y muy sensible para la detección de contaminación microbiana.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
El reactivo SLP reacciona fuertemente con el PG y BDG, lo que induce la formación de un pigmento de melanina negro, lo que se puede monitorear ya sea por detección visual o cuantitativamente midiendo la absorbancia a 650 nm.
Para esa última aplicación, se puede hacer el análisis por medio del Toxinometer™ET-7000.
La cuantificación se logra mediante el seguimiento de la formación de melanina mediante medición del tiempo de activación (Ta o tiempo de inicio) de la reacción, o sea el momento en el que la absorbancia alcance un umbral predeterminado. Al correlacionar el valor medido con una curva de calibración generada previamente con un estándar de PG, las concentraciones absolutas de PG y BDG se pueden determinar con una sensibilidad en el rango inferior de pg/ml.
